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顯微物鏡的基本參數

發布時間:2021-12-03 11:46:08 瀏覽量:6225 作者:Leon

摘要

光學顯微鏡主要由目鏡、物鏡、載物台和反光鏡組成,它能觀察到人眼無法分辨的微觀世jie,物鏡將樣品成放大的實像,它是直接與(yu)

顯微鏡的性能息息相關(guan) 的。

正文


顯微物鏡的基本參數

1.數值孔徑

數值孔徑可反映光學係統能夠收集的光的角度範圍,數值孔徑表示物鏡焦麵處收光角度的大小。它簡寫(xie) 為(wei) NA,它由物鏡和待測樣品之間介質折射率(n)與(yu) 物鏡孔徑角的一半(θ/2)的正弦值的乘積決(jue) 定,可表示成:NA=n×sinθ/2。其中n為(wei) 物鏡中透鏡工作介質的折射率(如空氣的折射率是1.0,水的折射率是1.33,油類的折射率則可高達1.56)。θ則是光進出透鏡時一半的Z大角度,或者可以表述為(wei) 是從(cong) 物在光軸上一點到光闌邊緣的光線與(yu) 光軸的夾角。由於(yu) 數值孔徑的定義(yi) 中考慮了折射率的因素,因此一束光在通過平麵由一種介質進入另一種時,數值孔徑仍是一個(ge) 常量。在空氣中,透鏡的孔徑角大小近似等於(yu) 數值孔徑的兩(liang) 倍(在近軸近似的條件下)。數值孔徑是相對於(yu) 物或像上的特定一點而言的,因此其大小也會(hui) 隨著該點的移動而改變。在顯微學領域,如不特加注明,數值孔徑一般是針對物一側(ce) 而言的。


2.焦深

物鏡的焦深為(wei) 物鏡對表麵較為(wei) 不平的樣品仍能夠清晰成像能力的參數,當物鏡準確聚焦於(yu) 某一樣品表麵時,如果位於(yu) 該表麵前麵及後麵的物麵仍然能被觀察清晰,則該兩(liang) 前後平麵間的距離就是焦深。物鏡的焦深主要取決(jue) 於(yu) 物鏡的數值孔徑,數值孔徑越大,焦深越小。在物鏡的數值孔徑特別大時,顯微鏡能有非常好的分辨率,但焦深會(hui) 很小。因此要根據實際需要選擇數值孔徑合適的物鏡。當顯微鏡用於(yu) 高倍觀察時,由於(yu) 焦深小,隻有在樣品表麵高低差別很小時能清晰成像。


3.齊焦距

齊焦距離是指對準焦點時的物鏡鏡體(ti) 定位麵到物體(ti) 表麵的距離。齊焦距離的國際標準明確為(wei) 45 mm。也有個(ge) 別廠家會(hui) 用60 mm的齊焦距離。這種非標準的,還不很完善的係統由於(yu) 光路設計比較長,光損失比較大(光損失是以um為(wei) 單位計算的,尤其在熒光国产成人在线观看免费网站領域廣泛)。45 mm的齊焦設計可以在Z短光程的基礎上實現高分辨率,高視場亮度的效果。


4.工作距離

物鏡的工作距離是指顯微鏡準確聚焦至樣品表麵後,待測樣品表麵與(yu) 物鏡的Z前端表麵之間的距離。物鏡的放大率越高,工作距離越短。使用時,待測樣品應位於(yu) 物鏡的一到二倍焦距之間。因此,它和焦距是兩(liang) 個(ge) 不同的參數,顯微鏡調焦的步驟實際是在調節物鏡的工作距離。在物鏡數值孔徑一定的情況下,工作距離短,孔徑角則大。數值孔徑大的高倍物鏡,其工作距離小。


5.分辨率

分辨率是指能清晰的分辨待測樣品表麵兩(liang) 點間的Z小距離,通常用d表示。分辨率決(jue) 定了顯微鏡分辨樣品上細節的程度。顯微鏡的物鏡是使物體(ti) 放大成實像目鏡的可以讓物鏡的實像再次放大,所以目鏡隻會(hui) 放大物鏡能分辨的細節,物鏡不能分辨的細節,不可能通過目鏡放大而變得可分辨。因此顯微鏡的分辨率主要取決(jue) 於(yu) 物鏡的分辨率。


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