顯微鏡由於(yu) 其強大的作用被集成到很多的光學顯微測量、表征設備中,對樣品的成像和捕捉需要利用顯微鏡自己的照明方式在相機上成像,例如低波數顯微共聚焦拉曼光譜儀(yi) 。
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顯微鏡的白光照明方式
顯微鏡的照明方式按照其照明光束的照射方向,可被分為(wei) 透射式照明和反射式照明兩(liang) 大類。顧名思義(yi) ,透射式照明方法可以用來照亮透明或半透明的被檢物體(ti) ,由於(yu) 載玻片的使用,絕大數生物顯微鏡屬於(yu) 此類照明法;反射式照明方法可以用來照亮完全不透明的被檢樣品,光束從(cong) 樣品上方照射,主要国产成人在线观看免费网站於(yu) 金相顯微鏡或熒光鏡檢法。
1. 透射式照明
透射式照明方法按照其光軸方向又分中心照明和斜射照明兩(liang) 種形式:
(1) 中心照明:中心照明是最普遍的透射式照明法,其特點是照明光束的中軸與(yu) 顯微鏡的光軸同在一條直線上,一般從(cong) 待觀察樣品的正下方入射。它又分為(wei) 臨(lin) 界照明和柯勒照明兩(liang) 種。
圖1.臨(lin) 界照明
臨(lin) 界照明:如上圖1,臨(lin) 界照明的光源經聚光鏡聚焦後成像在待觀察樣品上,光束狹而強,這是它的優(you) 點。但是光源的燈絲(si) 像與(yu) 被檢物體(ti) 的平麵重合,這樣會(hui) 造成待觀察樣品表麵的照明不均勻,在有燈絲(si) 像的部分照明比較亮;無燈絲(si) 像的部分照明就較為(wei) 暗,不僅(jin) 會(hui) 影響成像的質量,更不適合顯微照相,這是臨(lin) 界照明的主要缺陷。針對上述問題的解決(jue) 方法是在光源的前方放置乳白和吸熱濾色片,使照明變得較為(wei) 均勻和避免光源的長時間的照射而損傷(shang) 被檢物體(ti) 。
圖2.柯勒照明
柯勒照明:柯勒是十九世紀末蔡司廠的工程師,為(wei) 了紀念他在光學領域的突出貢獻,後人把他發明的二次成像叫做柯勒照明。柯勒照明,是用燈絲(si) 光源給標本提供均勻的照明。如上圖2所示,柯勒照明係統由一個(ge) 光源、兩(liang) 個(ge) 鏡組、孔徑光闌和視場光闌構成。孔徑光闌緊靠於(yu) 聚光鏡前組放置,是一個(ge) 可變光闌。孔徑光闌經聚光鏡後組成像在顯微係統的待測樣品表麵上。而照明光源經過聚光鏡前組成像於(yu) 視場光闌處,視場光闌位於(yu) 聚光鏡後組的物方焦麵上(也是可變光闌),這樣,光源經過聚光鏡後組後將成像在無窮遠處。並且同時,視場光闌經聚光鏡後組成像於(yu) 無窮遠處。柯勒照明係統是將光源上每個(ge) 點所發出的同心光束變成平行光束照射在物麵上,從(cong) 而避免了對物麵上各個(ge) 位置的照明不均。柯勒照明係統也可以看作是將臨(lin) 界照明係統的「光源」替換為(wei) 「光源+前置物鏡+光闌」,從(cong) 而將光源通過前置物鏡成像在臨(lin) 界照明的「孔徑光闌」處。實際上,柯勒照明的孔徑光闌位於(yu) 臨(lin) 界照明的光源位置。柯勒照明克服了臨(lin) 界照明的缺點,這種照明法不僅(jin) 觀察效果佳,而且是成功地進行顯微照相所必須的一種照明法。此外,這種照明的熱焦點不在被檢物體(ti) 的平麵處,即使長時間的照明,也不致損傷(shang) 被檢物體(ti) 。
(2) 斜射照明:斜射照明方法中,白光光束的光軸與(yu) 顯微鏡主體(ti) 的光軸不在同一條直線上,而是與(yu) 顯微鏡主體(ti) 光軸有一定的夾角,斜入射在待測樣品上,因此稱呼為(wei) 斜射照明。相襯顯微術和暗視野顯微術就是斜射照明。
2. 反射式照明
反射式照明的光束來自物體(ti) 的上方,與(yu) 顯微鏡的主體(ti) 光軸重合,通過顯微聚焦物鏡後照射到待測樣品上,因此物鏡同時又起到了聚光鏡的作用。這種照明法是適用於(yu) 非透明物體(ti) ,如金屬材料、礦物等。
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