光片熒光顯微鏡技術已經徹底改變了生物顯微鏡技術，使生物樣品的低光毒性長期3D成像成為(wei) 可能。
光片熒光顯微鏡(LSFM)簡介
光片熒光顯微鏡技術已經徹底改變了生物顯微鏡技術，使生物樣品的低光毒性長期3D成像成為(wei) 可能。
光片熒光顯微鏡(LSFM)是一種簡單但功能強大的成像技術，可以對活體(ti) 標本進行快速且無光毒性的3D檢查。大多數LSFM實現依賴於(yu) 熒光報告的樣品標記來成像目標生物結構。這提供了熒光顯微鏡的特異性優(you) 勢，使其在各種生物實驗中取得成功。在LSFM中，通過樣品的激光光片介導熒光激發。在其通過組織的傳(chuan) 播過程中，部分激光向檢測攝像機散射，這些光通常被特定的濾光片阻擋和丟(diu) 棄。然而，這種散射光可以攜帶有關(guan) 樣品結構和組成的有價(jia) 值的信息。當散射是非彈性的，例如拉曼散射時，得到的光譜可以提供三維的樣品化學成分信息。另一方麵，當散射是彈性時，它揭示了樣品在不同空間尺度上的結構信息:遠小於(yu) (瑞利散射)，與(yu) (米氏散射)相當，甚至遠大於(yu) (幾何散射)光的波長。這是由於(yu) 方法協議的變化。12個(ge) 折射率中的2個(ge) ，即光散射的來源，是局部分子密度的度量，因此也是生物樣品結構的度量。除了光學相幹斷層掃描(OCT)技術外，樣品的彈性散射很少用作生物成像的對比源。OCT依靠樣品的紅外光後向散射產(chan) 生組織的橫截麵圖像。在分辨率和穿透深度方麵，OCT介於(yu) 超聲成像和光學顯微鏡之間，並且由於(yu) 其通用性已成為(wei) 醫學許多領域的重要工具。然而，當相幹光的彈性散射用於(yu) OCT或其他成像方式時，由於(yu) 組織和其他細胞複合物典型的非均勻折射率，在穿過樣品時產(chan) 生複雜的幹涉場。由於(yu) 其顆粒狀外觀，該領域被稱為(wei) “散斑圖案”，對於(yu) 成像国产成人在线观看免费网站，它通常被認為(wei) 是有害的，因為(wei) 它疊加了感興(xing) 趣的特征。在某些国产成人在线观看免费网站中，當国产成人在线观看免费网站波前整形時，可以利用散斑圖來克服不透明樣品中的散射和擴散，但在複雜性和一般適用性方麵並非沒有限製。
因此，散斑使得彈性散射成為(wei) 光片成像對比度來源的不良候選，因為(wei) 它引入了不希望的局部強度調製，與(yu) 樣品自身特征產(chan) 生的強度對比度完全無法區分。盡管如此，薄片彈性散射顯微鏡已經用於(yu) 植物根係表型分析，其中圖像質量被證明取決(jue) 於(yu) 安裝基板和樣品的濁度。為(wei) 了減少襯底的誘導背景和散斑噪聲，該技術進一步更新為(wei) 包括偏振濾波和軸向掃描，但代價(jia) 是降低了顯微鏡的軸向分辨率。另一種基於(yu) 彈性散射的不同實現使用低相幹光片照明，而不是軸向掃描，以減少斑點。在這種情況下，我們(men) 使用一堆遮光片來產(chan) 生一組以不同角度傳(chuan) 播的光片，這些光片被加在一起以抵消斑點。該技術被国产成人在线观看免费网站於(yu) 增強小鼠大腦未染色的形態學神經元結構的可視化。
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