熒光原位雜交，取英文首字母簡稱為(wei) FISH，是一種根據堿基互補配對原則，利用熒光標記的DNA探針和細胞或組織中特定DNA或RNA上的特點區域進行雜交，zui終使其可以通過熒光顯微鏡直接觀察。為(wei) 了在觀察過程中獲得較好的效果，照明的質量和功能至關(guan) 重要。Lumencor的SOLA FISH固態光源是針對FISH国产成人在线观看免费网站進行優(you) 化的，提供了五大優(you) 勢，成為(wei) 各種研究和臨(lin) 床環境中FISH国产成人在线观看免费网站的選擇。
固態光源點亮熒光原位雜交技術---提升生物醫學研究和臨(lin) 床診斷新選擇
什麽(me) 是FISH？
當然這裏的FISH並非水裏遊的魚類，而是熒光原位雜交（fluorescence in situ hybridization，簡稱FISH），這是一種基於(yu) 雙鏈核酸互補堿基配對的細胞或者組織中特定核酸序列（DNA或者RNA）檢測的技術。就如同釣魚一般，根據堿基互補原則，當使用已知標記單鏈核酸為(wei) 探針（餌），如果與(yu) 樣品中的未知單鏈核酸（魚）發生了特異性結合，形成可被檢測的雜交雙鏈核酸，並對該特定核酸順序進行精確定量定位。
F:熒光（Flourescence）顯微鏡用於(yu) 對靶核酸序列位置進行成像。該技術的其他變體(ti) 也使用顯色原位雜交（CISH）。
IS:靶核酸序列在其所在的細胞或組織的空間環境中原位（in suit）檢測。FISH提供有關(guan) 位置的信息，以及靶核酸序列的同一性和多樣性。
H:識別特定核酸序列的基本原理是通過互補堿基配對將單鏈探針序列與(yu) 單鏈靶序列雜交（hybridization）（圖1）。
圖1.熒光原位雜交(FISH)示意圖。用於(yu) 臨(lin) 床細胞遺傳(chuan) 學的DNA探針通常長度約為(wei) 100,000個(ge) 堿基(100 kb)，每100個(ge) 堿基約有5個(ge) 染料。
FISH在生物醫學研究中的国产成人在线观看免费网站
FISH使科學家和臨(lin) 床醫生能夠繪製基因圖譜，研究染色體(ti) 組織，診斷和評估遺傳(chuan) 疾病，並表征染色體(ti) 異常。一個(ge) 感興(xing) 趣的領域是染色體(ti) 末端端粒區域的分析。端粒通過保護染色體(ti) 末端不降解，在細胞分裂過程中保存遺傳(chuan) 信息方麵發揮著關(guan) 鍵作用。端粒異常（如重複或缺失）可以通過使用FISH的篩選輕鬆識別，其中端粒用熒光探針序列標記（圖2）（1）。鑒於(yu) 端粒不規則性可導致各種疾病，例如與(yu) 年齡相關(guan) 的綜合征或癌症，端粒畸變的鑒定可以為(wei) 疾病機製提供新的見解，並指導靶向治療的開發（2）。
（1）Telomere analysis using 3D fluorescence microscopy suggests mammalian telomere clustering in hTERT-immortalized Hs68 fibroblasts.
（2）Molecular cytogenetic analysis of telomere rearrangements.
雖然FISH是生物醫學研究中使用的強大細胞遺傳(chuan) 學工具，但細胞內(nei) 特定核酸序列的可視化在很大程度上依賴於(yu) 照明的質量和功能。通過在麵對嚴(yan) 苛的工作負載時能保持始終如一的性能，Lumencor 光引擎使臨(lin) 床醫生、研究人員和設備製造商能夠實現更好的基因組和分子診斷。
圖2.人類細胞的染色體(ti) 組型，該細胞在分裂中期含有46條染色體(ti) 。DNA以DAPI染色（藍）並通過使用PNA-TeIC探針(綠)以FISH檢測端粒。由於(yu) 每條染色體(ti) 含有兩(liang) 個(ge) 染色單體(ti) ，並且每個(ge) 染色單體(ti) 中都包含兩(liang) 個(ge) 端粒，因此共觀察到184個(ge) 雜交探針。（圖像比例尺=5μm）
*圖像是使用Nikon Ti Eclipse寬場係統和Lumencor Light Engine獲取的，Lumencor係列固態光源可以適配各類主流顯微鏡品牌。
FISH光源的五大照明要求，固態光源來滿足
1.支持多重檢測的光譜範圍
Lumencor的SOLA FISH光引擎是為(wei) FISH国产成人在线观看免费网站量身定做的型號，其輸出的光譜允許使用具有五個(ge) 或者更多激發/發射波長範圍的熒光標記來同時檢測相應數量的不同DNA靶序列。遺傳(chuan) 性疾病通常是多因素的，因此這種光譜的多樣性是一種普遍的要求。例如，特異性分析物試劑盒（analyte specific reagent kits) 如Vysis MultiVysion PB 多色FISH探針試劑盒 (Abbott Molecular) 可以用於(yu) 同時檢測13、16、18、21和22號染色體(ti) 的拷貝數，這對於(yu) 檢測對胎兒(er) 健康和生存能力有重大影響的染色體(ti) 異常至關(guan) 重要。固態光源（如SOLA FISH）有助於(yu) 設計光譜輸出，以盡可能滿足於(yu) 此類細胞遺傳(chuan) 性測試的要求（圖3）。
圖3.SOLA FISH光引擎輸出光譜和chroma激發濾光片，用於(yu) SpectrumBlue、SpectrumAqua、SpectrumGreen、SpectrumGold 和 SpectrumRed。這些熒光團被摻入用於(yu) 確定染色體(ti) 13、16、18、21 和 22 的拷貝數的 FISH 探針中，這在多重檢測允許同時檢測。
2.線性光強調製
使用SOLA FISH等固態光源時，輸出光可通過20倍動態範圍的線性控製響應進行電子衰減。當需要調整照明強度以適應樣本之間的差異時，通過電子軟件控製即可完成，這是可預測和可重複的方式，而無需插入中性密度濾光片等附加光學元件。此外，使用電子衰減時輸出光譜也不會(hui) 受影響。
3.設備間的一致性
當購買(mai) 用於(yu) 多個(ge) 細胞遺傳(chuan) 學檢測設備的光源組時，所有光源的性能和操作特性的一致性至關(guan) 重要。低方差意味著內(nei) 部數據一致和操作效率。固態光引擎（如 SOLA FISH）顯然滿足這些要求，多個(ge) 設備間光譜輸出相當一致（圖 4）。
圖4.隨機選擇的28台Lumencor SOLA光引擎的光譜分布和光功率。2%的方差係數表明光引擎之間的一致性和相同的有效性能。
4.使用壽命長、運行可靠
固態光源無需維護，與(yu) 每年需要數千美元更換燈泡的汞燈以及金屬鹵化物燈相比，其耗材費用極低。SOLA FISH的成本可以在其10-15年的工作壽命內(nei) 的2-3年內(nei) ，通過耗材支出的節省得到回收。
5.內(nei) 置計量和自動化兼容性
SOLA FISH 等現代固態光源集成了板載微處理器，除了控製操作外，還可以監控係統性能。累計光輸出時長、功耗和內(nei) 部工作溫度等數據可用於(yu) 上傳(chuan) 到實驗室信息管理係統 （LIMS） 並支持監管合規性驗證。此外，多個(ge) 光引擎可以通過以太網連接，允許從(cong) 單個(ge) 中心點進行操作控製。
總的來說，Lumencor的SOLA FISH光引擎結合了厲害的技術、可靠性和成本效益，使其成為(wei) 各種研究和臨(lin) 床環境中FISH国产成人在线观看免费网站的選擇。
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