定量相位成像&熒光成像
定量相位成像&熒光成像
Phasics提供一種新的定量相位成像技術,不需要標記的情況下可以觀察到活細胞,並且準確的對細胞遷移,生長過程做統計分析。這種即插即用的相機依賴於(yu) 一種橫向剪切幹涉的專(zhuan) 利技術,它可以直接測量穿過細胞的光束相位。這種技術的優(you) 勢在於(yu) 極大的增強了觀察細胞是的對比度。而且Phasics的技術通過直接測量穿過標本光束的相位,能夠提供關(guan) 於(yu) 標本的大量信息。
相較於(yu) 熒光成像,Phasics技術不需要任何標記,因此對於(yu) 生物標本沒有任何損壞。除此之外因為(wei) 測量的是生物內(nei) 在的特性,而不是標記染色,因此Phasics的信息更加可靠。最後,Phasics提供一個(ge) 細胞更加完整的視圖:即使沒有染色,所有結構也能夠清晰的顯示,這有助於(yu) 更好的了解標本及其相互作用。
溶酶體(ti) 測量
然而,在某些場合下,將應該成像和Phasics技術想結合會(hui) 非常有趣。這篇文章中,我們(men) 將定位並且測量溶酶體(ti) 的相位特征。將Phasics的設備連接一個(ge) 常用的明場顯微鏡,使用普通的鹵素燈作為(wei) 光源,光源前放置一個(ge) 近紅外濾光片。Phasics技術雖然能夠增強所有元素的對比度。但不幸的的是,多數囊泡近似圓形,通過簡單的觀察無法辨認出溶酶體(ti) 和囊泡之間的區別。因為(wei) Phasics技術測量的相位信息,它是正比於(yu) 樣品的折射率以及厚度的。當所有被觀測的物體(ti) 都是接近於(yu) 圓形的時候,可以通過區分他們(men) 之間的折射率來辨別物體(ti) 。
為(wei) 了能夠區分溶酶體(ti) 的相對折射率,使用一種特殊的熒光成像方法,隻對溶酶體(ti) 進行染色,改變其折射率。通過下圖分析可以得到,溶酶體(ti) 的折射率相對於(yu) 其他囊泡是有區別的。
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