延時成像技術是在固定時間點拍攝連續圖像以捕捉所觀察到的動態的一種技術。而活細胞成像是利用延時成像(從(cong) 毫秒到小時)研究活細胞的動態生理過程。在COVID-19疫苗的研發過程中,Lumencor白光光源的優(you) 良性能為(wei) 研究GFP表達與(yu) 疫苗療效的關(guan) 係提供了便利。
使用SOLA光引擎進行GFP表達延時成像探求與(yu) COVID-19疫苗療效的相關(guan) 性
通過脂質轉染遞送mRNA一直是RNA療法開發麵臨(lin) 的長期挑戰。此外,借助輝瑞/BioNTech和莫德納国产黄色在线观看所研發的由脂質納米顆粒(LNP)以及mRNA組成的COVID-19疫苗,脂質遞送技術獲得了更多的關(guan) 注。了解mRNA-脂質體(ti) 複合物製劑和細胞外培養(yang) 基組成對蛋白質免疫原下遊表達的影響顯然很重要,而蛋白質免疫原反過來又決(jue) 定了疫苗的功效。2019年,在COVID-19大流行開始之前,來自慕尼黑大學和紐約州立大學石溪分校的一組研究人員描述了用單細胞陣列活細胞成像(LISCA)來監測mRNA陽離子脂質轉染後GFP表達的起效和速率。將單細胞排列在微圖纖連蛋白基底上(圖1A),與(yu) mRNA-脂質複合物培養(yang) 1小時,然後通過延時熒光顯微鏡監測20小時(圖1B)。
為(wei) 了使GFP熒光真實地展現蛋白質表達水平,穩定且可重複的激發光源至關(guan) 重要,這使得SOLA光引擎成為(wei) 該国产成人在线观看免费网站的理想高性能照明光源,並且低熱量與(yu) 低噪聲也便於(yu) 獲得更加優(you) 質的圖像信息。除了表征起效時間和蛋白表達速率的顯著細胞間變異性(圖1)外,LISCA還用於(yu) 確定血清蛋白對不同mRNA-脂質複合物製劑的細胞攝取的影響。
圖1:(A)單個(ge) GFP表達的HuH7細胞排列在微圖纖連蛋白上。(B)代表GFP表達的單細胞熒光軌跡。灰色陰影區域表示mRNA -脂質複合物培養(yang) 的zui初1小時。(C) 是(B)的放大區域,顯示細胞間蛋白表達起效的變異。根據知識共享署名許可條款,轉載自Reiser等人(2019)[1]。
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相關(guan) 文獻:
[1] Reiser A , Woschee D , Mehrotra N , et al. Correlation of mRNA delivery timing and protein expression in lipid-based transfection[J]. Integr Biol (Camb), 2019(9).
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