革新多路复用荧光检测长久以来,在复杂、异质的样品中同时识别以及定位多个分子或者分子组装的能力一直是推动荧光显微镜在生物和物理科学研究中国产成人在线观看免费网站的主要特性。例如,自1986年以来,使用四种光谱上的不同荧光团来识别DNA中的腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T)、胞嘧啶(C)和鸟嘌呤(G)碱基,这一直是大多数自动化DNA测序技术的基础。然而,对大规模生物系统的基因组和转录组的研究可能需要同时识别和定位成百上千的分子标靶。这种高度并行的分析超出了基于光谱鉴别的多路复用能力。Lumencor分析了基于光谱鉴别的多路复用荧光检测的局限性,以及为扩大可检测标靶数量而引入的一些固态光源新技术。光谱鉴别的局限性大多数多路复 ...
门控拉曼的荧光抑制方法及分类门控法属于时域法。前两种方法的主要优点是考虑了拉曼散射和荧光响应的不同时间行为。第三种方法利用了即使在不同波长下荧光也具有更宽光谱特性的事实,而拉曼发射光谱与激发波长耦合。该方法值得注意的技术包括位移激发拉曼差分光谱(SERDS)和减位移拉曼光谱,两者都需要在光谱采集之后进行额外的步骤。将传统的连续波拉曼系统转换为基于CCD光谱仪的SERDS设置只需要小小的修改,即合并两个稍微波长移位的激光激发源,通常在全宽半MAX(FWHM)时分开。一旦荧光变宽或扭曲拉曼峰,计算方法提高信噪比的能力有限。另一个缺点是,由于像素对像素灵敏度的随机变化大于实际的拉曼信号,它们可以忽略 ...
引擎用于多重荧光检查十多年以来,Lumencor的SPECTRA X光引擎一直是荧光显微镜领域的第1选择,以其多功能性和卓越性能而著称。它为研究人员提供了激发光谱的精确控制,在z小化串扰(crosstalk)、光谱渗漏(bleed-through)、自发荧光(autofluorescence)以及其他有害背景来源的同时也优化了激发的效率【1】。SPECTRA X光引擎(2023)在其新版本中保留了用户可更换的带通滤光片,同时引入几项重大改进:扩展光谱内容:新型号采用固态LED光源,增大了光谱范围,同时增强了与带通滤光片和荧光基团的兼容性,其中包括 365 nm 和 660 nm 处的新激发窗口 ...
- mpt是荧光寿命成像的合适探测器。2. CCDs and ICCDs一般来说,ccd是RS中特别常用的检测器变体,但对于TG设置,它们需要高度敏感(单光子计数能力),允许快速外部触发,并具有亚纳秒范围内的时间分辨率。iccd符合这些要求。光学克尔门控,它的作用就像光谱仪入口狭缝前的一个光百叶窗,已经被几个小组用来触发CCD。这种设置需要空间,因此限制了系统的可移植性。Talmi制定了拉曼多通道和门控检测的选择指南。1993年,Tahara和Hamaguchi首先通过构造一个增强的基于ccd的条纹相机实现了高灵敏度和良好的时序分辨率。TG拉曼装置中的条纹相机将样品的背散射光引导到光电阴极上; ...
理论上证明了荧光干涉还原的概念。另一位先驱是Richard Van Duyne,他也是表面增强拉曼效应的发现者之一。1974年,Van Duyne研究小组首次通过实验证明,使用罗丹明6g染料掺杂苯样品可以抑制荧光,同时通过光电倍增管(PMT)和脉冲氩离子激光源在488nm激发下的组合来提高信噪比。1976年,Yaney使用与Van Duyne等人类似的装置,但使用不同的脉冲激发源(ps脉冲Nd:YAG, 532 nm掺钕钇铝石榴石激光器),发现TG拉曼与连续拉曼相比,在较短的激光脉冲宽度(约200 ns)下显著改善了苯中吖啶橙的三个主要拉曼波段的光谱结果。他还指出,环境光不会干扰门控拉曼光谱结 ...
间门和伴随的荧光抑制。根据图1(a)所示的工作原理,探测器仅在发射脉冲期间被激活,如图1(b)所示。图1(c)显示了门控(虚线)和连续光(连续线)工作模式之间的差异,每种模式都有一个有效的拉曼光谱。直到zui近,门控拉曼光谱仪的复杂性、尺寸和价格阻碍了它的广泛国产成人在线观看免费网站。过去已经使用了不同类型的探测器,例如多通道板(mcp),光倍增管(pmt)和超快速和强化电荷耦合器件(iccd),带有或没有克尔门。从本质上讲,这些设备需要探测器冷却,因此非常复杂和笨重(见表1)。自世纪之交以来,互补金属氧化物半导体(CMOS)单光子雪崩二极管(SPAD)阵列探测器已经商业化。CMOS spad具有显著减少上述缺点 ...
点是样品诱导荧光发射。这是一个竞争现象,发生在相对较弱的拉曼散射下,并且可以模糊整个拉曼光谱,使材料的识别或量化成为不可能。解决这一问题的有效方法是时间门控(TG),这是信号处理中常用的一种技术。热重光谱的目的是测量特定时间段内的信号,从而实现对瞬态过程的监测。早在20世纪70年代,随着科学家们在测量过程中寻找去除荧光背景信号的方法,TG就进入了RS领域。然而,TG拉曼直到zui近几年才开始商业化。为了扩大RS的普遍适用性,克服荧光限制是很重要的。RS基于从激发波长位移的光子的非弹性散射,称为Stokes和AntiStokes位移。它用于提供给定样品中受激分子的信息。与红外光谱(IR)类似,该 ...
输出用于激发荧光血管造影剂---吲哚菁绿(ICG)。除了光谱输出外,SPECTRA光引擎还提供了三个附加功能,可增加其在术中成像国产成人在线观看免费网站中的实用性:1.光传输SPECTRA光引擎的光输出通常以光纤束传输。光纤束可以进行分支,提供两路或者多个等分的光输出,这些光输出可以凭借不同的角度轨迹定向到手术区域。多向照明规避了可访问性和可见性的限制,在手术区域等密闭空间中实现三维成像。2.不同设备的一致性能这一特性对于消除外窥镜或者其他手术设备中光源的安装和验证中的不确定性至关重要。因此,SPECTRA光引擎进行设计、制造和测试,旨在从一个设备到另一个设备提供一致的性能。图3展现了这一特性,比较了50台SPE ...
传统的宽场荧光显微镜,(2) 荧光共聚焦显微镜,以及 (3) 双光子显微镜。2.液态变焦透镜技术Optotune的液态变焦透镜基于弹性聚合物材料。透镜的核心部分由一个薄膜组成,它在充满液体的腔室和空气之间形成一个界面(图1)。为了调节焦距,一个音圈执行器对围绕透镜清晰孔径的液体储层施加压力。液体因此被压入透镜中心,改变薄膜的曲率。控制液态变焦透镜非常简单,只需要一个现成的电流控制器或透镜驱动器,为透镜提供0到290mA的电流即可。图1 (a, b):Optotune液态变焦透镜的工作原理。电流控制的电磁或机械执行器向下推动充满液体的镜头容器,迫使镜头液体进入镜头中心并改变其形状 (c) 对于 ...
方式,可实现荧光光谱、拉曼光谱、荧光寿命、透射光谱、器件泵浦探测、光子反聚束多种探测模式,在原位超低温、磁场、电化学、放射性材料等多种条件下均可使用。图6:DMD(数字微镜阵列)和SLM(空间光调制器)在本文中,提出了一种仿生高动态范围偏振成像传感器。该传感器以两种方式模拟了螳螂虾的视觉系统:(1)它利用了四个不同的像素偏振滤波器,偏移45°,并集成了光敏元件;(2)底层光电二极管以正偏模式工作,对入射光子产生对数响应。通过整体结合这两项进步,我们创建了一个快照偏光计,工作速度为30 fps,动态范围为140 dB。传统CMOS成像传感器通过在反向偏置模式下操作单个像素的光电二极管,在入射光子 ...
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